|
| 產地 | 國內 |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZT2455 |
| 用途 | 僅用科研 |
| 包裝規格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 |
基本原理 先用隨機引物將 RNA 反轉錄成 cDNA，然后設計特異性的引物和熒光探針(TaqMan 探針),進行 熒光定量 PCR 檢測。TaqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它設計為與目標序列上游引物和下游引物 之間的序列配對。熒光基團連接在探針的 5’末端，而淬滅劑則在 3’末端。當完整的探針與目 標序列配對時，熒光基團發射的熒光因與 3’端的淬滅劑接近而被淬滅，但在進行延伸反應時， qTaq 聚合酶的 5’外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離,熒光強度得到檢測。 隨著擴增循環數的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累，因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
注意事項:
1. 試劑盒各組份使用前請充分融化并搖勻,離心管內的試劑需離心數秒后使用。 2 PCR操作各階段應在不同實驗室進行。
3 在試劑和標本準備階段使用負壓超凈臺。
4 應穿工作服，戴一次性手套（經常替換手套），使用一次性用品。
5 PCR操作人員應具有經驗和受過培訓。
6操作過程中用到的超凈臺、移液器、離心機、擴增儀等儀器設備應經常用10%次氯酸或70%乙醇或 紫外燈處理。
7 陽性對照應和待檢標本平行進行操作后方可進行PCR擴增。
