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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HXG696 |
| 用途 | 僅用科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產(chǎn)品之一，產(chǎn)品優(yōu)勢 樣品種類多，質(zhì)控嚴(yán)格，高特異性，供貨快，已被國內(nèi)外廣大科研工作者使用，被稱謂：質(zhì)量信得過產(chǎn)品
通用名稱：柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格：50T/盒
英文名稱：CAV-16Detection Kit (Real-Time PCR Method)
自備試劑：樣品 RNA
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒對(duì)柯薩奇病毒CA16型(基因保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測，從而達(dá)到快速檢測之目的。
試劑組成】
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名 稱 |
規(guī) 格 |
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酶液 |
50μL×1 管 |
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CAV-16反應(yīng)液 |
500μL×2 管 |
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CAV-16陽性質(zhì)控品 |
50μl ×1 管 |
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陰性質(zhì)控品 |
250μl×1 管 |
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃避光保存、運(yùn)輸、避免反復(fù)凍融，有效期12個(gè)月。
【適用儀器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用0℃冰代。
結(jié)果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線；
可疑：檢測通道 35值≤38，建議重復(fù)檢測，如果檢測通道仍為 35值≤38， 且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；
陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品：Ct 值>38 或無 Ct 值；
陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)試劑盒(熒光-PCR法)它具有下列特點(diǎn)：1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)馬動(dòng)脈炎病毒高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研
7.．不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，2-8℃保存，保存期限為12個(gè)月。
1. 取 200μL 處理好的樣本（不足 200μL，可以加入 PBS 緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足 200μL），加入 500μL
裂解液，振蕩 30 秒，室溫靜止 2 分鐘。注：針對(duì) 難裂解樣本，室溫靜置時(shí)間可延長至5 分鐘。
2. 把上述混合液轉(zhuǎn)移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免阻塞吸附膜），10000rpm 離心 1 分鐘，棄去套管中液體。
3. 向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。
4. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。
5. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。
6. 12000rpm 再次離心 2 分鐘。
7. 把吸附柱轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL 滅菌離心管中，向吸附柱中加入 50μL 洗脫液，并于室溫溫育 2 分鐘。
8.12000rpm 離心 1 分鐘，棄去吸附柱，1.5mL 滅菌離心管中液體即為 DNA/RNA 溶液。提取的 DNA/RNA
可直接用于各種下游應(yīng)用試驗(yàn)，如不立即使用，請(qǐng)于-80℃保存。
注意事項(xiàng)
：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
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