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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZW6541 |
| 用途 | 僅用科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 是否進口 |
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱：禽呼腸孤病毒(ARV)檢測試劑盒（熒光-PCR法）
【包裝規(guī)格】50 份/盒
【預期用途】
本試劑盒適用于檢測的血清或血漿、疑似污染 REV 的活病
毒疫苗等標本中禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒 RNA，適用于禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病
毒感染的輔助診斷。其檢測結(jié)果僅供參考。
禽呼腸孤病毒(ARV)檢測試劑盒（熒光-PCR法）【檢驗原理】
-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數(shù)不超過 5 次，有效期 12 個月。
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
水樣便取 0.5~1mL；疑似污染的食物取 1g
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。
1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1 樣本前處理
水樣便 13000rpm 離心 2min，去盡上清；疑似污染的食物用手術(shù)剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；疑似污染的水直接取 100μL
1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
本試劑盒用一對禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒特異性引物，結(jié)合一條特異性熒光
探針，用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒 RNA 進行體外擴
增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。
【試劑組成】
名 稱 規(guī) 格
酶液 50μl×1 管
REV 反應液 1.0ml×1 管
REV 陽性質(zhì)控品 50μl ×1 管
陰性質(zhì)控品 250μl ×1 管
說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
禽呼腸孤病毒(ARV)檢測試劑盒（熒光-PCR法）結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結(jié)果分析，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結(jié)果。
陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線；
可疑：檢測通道 35
陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。
陰性質(zhì)控品：Ct 值>38 或無 Ct 值；
陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。
PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實際就是一個溫控設(shè)備，能在變性溫度，復性溫度，延伸溫度之間很好地進行控制。
實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程， 通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
【注意事項】? 所有操作嚴格按照說明書進行；
? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化，完全混勻并短暫離心；
? 反應液應避光保存；
? 反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；
? 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
? 試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通 則》進行處理。
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