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上海滬崢生物科技有限公司
產品展廳
禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RTPCR試劑盒
  • 品牌:上海滬崢
  • 產地:國內
  • 貨號:HZT0486
  • 價格: ¥1380/盒
  • 發布日期: 2020-08-26
  • 更新日期: 2025-11-18
產品詳請
產地 國內
品牌 上海滬崢
貨號 HZT0486
用途 科研
包裝規格 50T/盒
純度 詳詢客服%
CAS編號
是否進口

上海滬崢專業生產銷售禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RTPCR試劑盒現貨,

本試劑盒引物經過優化,反應特異性強,即開即用,歡迎新老客戶咨詢訂購。,本試劑盒引物經過優化,反應特異性強,即開即用,歡迎新老客戶咨詢訂購。

產品詳細信息

中文名稱:禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RTPCR試劑盒

英文名稱:Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)

產品規格:50T/盒

用途】用于禽傳染性支氣管炎病毒的檢測、診斷和流行病學調查。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過5次,有效期12個月。

提示:本品僅用于科研實驗,不能用作醫療及臨床診斷。

禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RTPCR試劑盒使用方法

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區)

1.1 樣本前處理

組織:取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿,勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中;
液體標本:取適量標本13000rpm離心2min,棄上清。
1.2 DNA提取

1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液,100℃恒溫處理10分鐘,13,000 rpm離心5分鐘,取上清液轉移至新的1.5ml EP管,-20℃保存;
2. 試劑配制(試劑準備區)

根據代檢測樣本總數,設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1

管陰性對照+1管陽性對照),體系配制如下表:

試劑

WSSV 反應液

酶液

用量(樣本數為N)

20μl

1μl

3. 加樣(樣本處理區)

將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl,加入相應的

反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR擴增(核酸擴增區)

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內;

5. 結果分析判定

結果分析條件設定
設置基線(baseline):一般情況下,對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle,對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調整。
設置閾值(threshold):以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線(無規則的噪音線)的zui高點。
結果判斷
陽性:檢測樣本Ct值小于等于35.0,且曲線有明顯的指數增長期;
可疑:檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0,重復一次實驗,如果Ct值仍小于40.0,且曲線有明顯的指數增長期,為陽性,否則為陰性;
陰性:檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結果的解析

實驗室環境污染,試劑污染,標本交叉污染會出現假陽性結果;試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果。

7. 質控標準

陰性質控品:擴增曲線無對數生長期或無Ct值顯示;
陽性質控品:擴增曲線有明顯對數生長期,且Ct值≤32;
以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。


 

6. 檢測方法的局限性

樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;

樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;

陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;

病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;

不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;

試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果

本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RTPCR試劑盒

 注意事項
1.本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染,實驗要分區操作。
   1)*區:樣本制備區。
 2)*區:模板添加區。
   3)第三區:擴增及產物分析區。
    分區之間*進行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
2.實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套,不同區域獨立使用工具,需更換手套和實驗服。
3.嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4.反應液中的成分對光敏感,應避光保存。試劑使用前要完全解凍,但應避免反復凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。
5.反應結束后,擴增管請置于密封袋內丟棄,當日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
6.不同批號試劑請勿混合使用,在有效期內使用。


 

 


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