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| 產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HZT0424 |
| 用途 | 限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售根癌土壤桿菌PCR試劑盒現(xiàn)貨，
本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化，反應(yīng)特異性強(qiáng)，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu)。，本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化，反應(yīng)特異性強(qiáng)，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu)。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
中文名稱：根癌土壤桿菌PCR試劑盒
英文名稱：Agrobacterium tumefaciens
產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒
用途】用于根癌土壤桿菌的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過5次，有效期12個(gè)月。
提示：本品僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不能用作醫(yī)療及臨床診斷。
根癌土壤桿菌PCR試劑盒使用方法
操作步驟
1 病毒 RNA 的提取
1.1 取已處理的樣品、陰性對(duì)照和陽性對(duì)照，分別加入裂解液 600 μL，充分顛倒混勻，室溫靜置 3～
5 min。
1.2 將液體吸入吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免離心時(shí) 堵塞吸附柱），13000 rpm 離心 30 s。
1.3 棄去收集管中液體，加入 600 μL 洗液，13000 rpm 離心 30 s。
1.4 重復(fù)步驟 1.3。
1.5 棄去收集管中液體，13000 rpm 空柱離心 2 min，以除去殘留的洗滌液。
1.6 將吸附柱移入新的 1.5 mL 離心管中，向柱中央加入洗脫液 50 μL，室溫靜置 1 min，13000 rpm
離心 30 s，離心管中液體即為模板 RNA。
2 實(shí)時(shí)熒光 RT-PCR 操作
設(shè)被檢樣品、陰性對(duì)照和陽性對(duì)照總和為 N，則反應(yīng)體系配制如下： 試劑 體系
在PCR 管中加入下列成分：
成份 |
樣品 |
陽性對(duì)照 |
陰性對(duì)照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer， 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對(duì) | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對(duì)照 | 無 | 2 uL | 無 |
補(bǔ)超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則：閾值線設(shè)定于剛好超過陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音
情況進(jìn)行調(diào)整。
2 結(jié)果描述及判定
陽性對(duì)照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無 Ct 值并且無特定擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立；被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線為 AIV 陽性；被檢樣品 30＜Ct＜37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線，需重新取樣提取 RNA，擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定，如仍是可疑，可判定為陽性；被檢樣品 Ct 值≥37 時(shí)，超過本方法檢測(cè)靈敏度范圍，判定為陰性；對(duì)于某些未呈現(xiàn) S 型曲線，但本底較高的樣 品，應(yīng)為陰性。
根癌土壤桿菌PCR試劑盒注意事項(xiàng)】
? 所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；
? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完全混勻并短暫離心；
? 反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
? 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；
? 實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；
試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理
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