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| 產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZW0420 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱：類志賀鄰單胞菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
包裝：48T
分類：pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實(shí)驗(yàn)使用，不用于臨床診斷等
目的：本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發(fā)病動物等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本中禽流感病毒rna，用于禽流感病毒感染的輔助診斷，其檢測結(jié)果僅供參考。
類志賀鄰單胞菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對引物的同時(shí)加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個報(bào)告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；剛開始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
類志賀鄰單胞菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（30 uL 體系）
在PCR 管中加入下列成分：
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer， 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補(bǔ)超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
類志賀鄰單胞菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)電泳檢測RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的PCR 產(chǎn)物長度為 286 bp。
實(shí)驗(yàn)操作
1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)?/span>NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。
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