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| 產地 | 國內 |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZW0419 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規格 | 48T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 |
產品名稱：隱孢子蟲核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
包裝：48T
分類：pcr-熒光試劑盒
用途:本產品僅供科研與實驗使用，不用于臨床診斷等
目的：本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發病動物等組織、體液或淋巴結等標本中禽流感病毒rna，用于禽流感病毒感染的輔助診斷，其檢測結果僅供參考。
隱孢子蟲核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。
隱孢子蟲核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 設置 RT-PCR 反應（30 uL 體系）
在PCR 管中加入下列成分：
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer， 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機，按下面參數進行 RT-PCR。
隱孢子蟲核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 電泳檢測RT-PCR 產物。預期的PCR 產物長度為 286 bp。
實驗操作
1.模板制備（樣本制備區）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產品，具體過程詳見產品說明書。
2.添加模板（模板添加區，放置于冰盒上進行）
剪下所需測試數的已含有反應液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應液中分別加入5μL模板，順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應（擴增及產物分析區）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團選擇FAM，淬滅基團選擇TAMRA。
